旋光计是研究物质旋光性的仪器,通常用于确定穿过旋光物质的平面偏振光的旋光大小和方向,从而定量地确定旋光物质的浓度,确定某些有机分子的三维结构。
(1)将旋光计连接至220V交流电源,打开电源开关,大约5分钟后,钠灯将正常发光,然后即可开始测量。调节目镜的焦点,使视野非常清晰。当旋转器未配备旋转物质时,视场中各部分的亮度相同。
在目镜中观察到的中间和侧面具有不同亮度和暗度的三分区视场可能具有以下条件:中间稍暗,两侧强光;中间较暗,视野两侧较亮;场的两侧都较暗,中间更亮;视野中三个区域的亮度变暗,亮度和暗度趋于相等,三点视野消失。此方法是区分三点视场的明暗度的灵敏方法,因此读数是将分析仪转向三点视场并消失时的读数。整个视场都是明亮的,但是由于视场太亮,不利于确定三点视场是否消失,因此无法通过这种标准来测量旋光度。
(2)零点校准蒸馏水是一种非光学活性物质,可以用于校准仪器的零点(即,α=0时仪器刻度盘上的读数)。校准时,清洁200mm的样品管,将其一端密封,用蒸馏水填充,并使管口成凸状液面,再加一块玻璃盖和一个螺帽盖(应(试管中没有气泡),但建议不要拧紧盖子,以免压碎玻璃。用滤纸擦拭旋光仪两端的玻璃板,然后将它们放入旋光仪中。打开光源并调整焦点以使视野清晰。旋转转盘先进行粗调,然后再进行细调以使视场变暗。当三点视野消失时,记下转盘的读数,重复操作三次,取平均值。这是旋光仪的零点,稍后将对其进行测量。零点校正值应减去或加到该值上。
(3)用与(2)相同的方法测量样品的旋光度。
(4)注意事项旋光计的金属部分一定不能被酸或碱污染,以避免腐蚀。每次测量之前,旋光仪周围和两端的玻璃板都必须清洁。实验结束后,应擦净旋光仪测量罐的内外,并用水冲洗旋光仪管并使其干燥。